Хиноцетонът е синтетичен хиноксалин - 1,4 - диоксидно производно, което се използва като промотор на растеж и антибактериален агент в животновъдството. Въпреки това, наличието на хиноцетонови остатъци в млякото може да представлява потенциални рискове за здравето на хората. Като доставчик на хиноцетон разбирам значението на точното откриване на тези остатъци. В този блог ще въведа няколко метода за откриване на остатъци от хиноцетон в млякото.
Хроматографски методи
Течна хроматография с висока производителност (HPLC)
HPLC е един от най -често използваните методи за откриване на хиноцетонови остатъци в млякото. Този метод се основава на принципа за разделяне на различни компоненти в извадка според тяхното взаимодействие със стационарна фаза и мобилна фаза. В случай на откриване на хиноцетон, пробата на млякото първо се обработва за екстрахиране и пречистване на хиноцетона. Това обикновено включва стъпки като утаяване на протеини, екстракция с органични разтворители и екстракция на твърда фаза (SPE).
След предварително третиране пробата се инжектира в HPLC системата. Хиноцетонът в пробата ще бъде отделен от други компоненти, докато преминава през колоната. За откриване на хиноцетона се използва детектор, като детектор на UV -Vis или флуоресцентен детектор. Времето за задържане на хиноцетон в колоната се сравнява със стандартен разтвор на хиноцетон и пиковата площ или височината се използва за количествено определяне на количеството хиноцетон в пробата.
Предимството на HPLC е високата му ефективност и чувствителност на разделяне. Той може точно да открие следи от хиноцетон в млякото. Оборудването обаче е сравнително скъпо и операцията изисква професионални умения. Също така, процесът на лечение преди лечение е време - консумиращ и сложен, което може да повлияе на точността на резултатите, ако не се извършва правилно.
Газова хроматография - масспектрометрия (GC - MS)
GC - MS е друг мощен аналитичен метод за откриване на хиноцетонови остатъци. При този метод пробата първо се изпарява и след това се разделя в колоната за газов хроматограф въз основа на променливостта и афинитета на компонентите към стационарната фаза. След разделянето компонентите влизат в масспектрометъра, където са йонизирани и фрагментирани. Измерва се съотношението на масата - към - заряд на йоните и полученият мас -спектър може да се използва за идентифициране и количествено определяне на хиноцетона.
Предварителното лечение на млечната проба за GC - MS е подобно на това за HPLC, но може да изисква допълнителни етапи на дериватизация, за да се направи хиноцетонът по -летлив. GC - MS има висока селективност и чувствителност и може да предостави повече структурна информация за хиноцетона, което е полезно за точна идентификация. Въпреки това, подготовката на пробата за GC - MS е по -сложна от тази за HPLC, а инструментът също е много скъп и изисква поддръжка на високо ниво.
Имунологични методи
Ензим - свързан имуносорбентен анализ (ELISA)
ELISA е имунологичен метод, основан на специфичното свързване между антиген (хиноцетон) и антитяло. При типична ELISA за откриване на хиноцетон антитялото срещу хиноцетон първо се обездвижва върху твърда повърхност, като микротитър. След това към плочата се добавя млечна проба, съдържаща хиноцетон, а хиноцетонът в пробата се свързва към имобилизираното антитяло. След измиване за отстраняване на несвързани вещества се добавя ензим, белязан вторично антитяло, което се свързва към комплекса с хиноцетон - антитяло. След това се добавя субстрат и ензимът катализира цвят - променяща се реакция. Интензитетът на цвета е пропорционален на количеството хиноцетон в пробата, което може да бъде измерено чрез спектрофотометър.
Предимството на ELISA е неговата простота, бързина и сравнително ниска цена. Може да се използва за скрининг с висока пропускателна способност на голям брой проби от мляко. Въпреки това, той има сравнително ниска специфичност в сравнение с хроматографските методи и може да има кръстосани реакции с други вещества в млякото, което може да доведе до фалшиви - положителни или фалшиви - отрицателни резултати.
Имунохроматографски анализ
Имунохроматографският анализ е прост и бърз метод за откриване на сайта. Той се основава на принципа на имунологичната реакция и хроматография. Обикновено се използва тестова лента, която съдържа подложка за проби, конюгирана подложка с белязани антитела срещу хиноцетон, нитроцелулозна мембрана с тестова линия и контролна линия и абсорбираща подложка. Когато пробата на млякото се добави към подложката на пробата, тя мигрира по протежение на лентата чрез капилярно действие. Ако хиноцетонът присъства в пробата, той се свързва с белязаните антитела на подложката на конюгата, а комплексът мигрира към тестовата линия, където се свързва с друг набор от антитела, образувайки видима линия. Контролната линия се използва за гарантиране на валидността на теста.
Този метод е много удобен и може да даде резултати в рамките на няколко минути. Той е подходящ за скрининг на ON - в стопанства или преработвателни централи за млечни продукти. Въпреки това, подобно на ELISA, тя има ограничена чувствителност и специфичност и може да осигури само качествени или полу - количествени резултати.
Методи, базирани на биосензор
Електрохимични биосензори
Електрохимичните биосензори се очертават като обещаваща алтернатива за откриване на хиноцетон. Тези сензори се основават на взаимодействието между биологичен разпознаващ елемент (като антитяло или ензим) и хиноцетон, който генерира електрохимичен сигнал. Например, имуносензор може да бъде конструиран чрез обездвижване на антитела срещу хиноцетон върху повърхността на електрода. Когато хиноцетонът в млечната проба се свързва с антителата, той причинява промяна в електрохимичните свойства на електрода, като тока или потенциала, които могат да бъдат измерени и свързани с количеството хиноцетон.
Предимството на електрохимичните биосензори е тяхната висока чувствителност, бърза реакция и потенциал за миниатюризация и интеграция. Те могат да се използват за реално наблюдение на времето на хиноцетонови остатъци в млякото. Въпреки това, развитието на стабилни и надеждни биосензори все още е изправено пред предизвикателства, като например обездвижването на елементите за биологично разпознаване и намесата от други вещества в млякото.
Оптични биосензори
Оптичните биосензори използват оптични сигнали за откриване на хиноцетон. Например, повърхностният плазмонов резонанс (SPR) - базирани биосензори могат да открият свързването между хиноцетон и антитела в реално време чрез измерване на промяната в коефициента на пречупване на повърхността на сензора. Друг вид оптичен биосензор е биосензорът на базата на флуоресценция, който използва флуоресцентно белязани антитела или други елементи за разпознаване. Когато хиноцетонът се свърже с елемента за разпознаване, има промяна в интензитета на флуоресценция, която може да бъде измерена.
Оптичните биосензори имат висока чувствителност и могат да предоставят реална информация за времето. Те също са сравнително лесни за работа. Цената на оборудването обаче е сравнително висока и работата на биосензорите може да бъде повлияна от фактори на околната среда като температура и рН.
В допълнение към хиноцетона, други ветеринарни лекарства катоСалиномицин,Мадурамцин амонийиНикарбазинСъщо така трябва да се наблюдава в млякото, за да се гарантира нейната безопасност. Всяко от тези лекарства има свой набор от методи за откриване, подобни на тези за хиноцетон, които включват комбинация от техники на хроматографска, имунологична и биосензорна основа.
Като доставчик на хиноцетон, аз се ангажирам да гарантирам качеството и безопасността на нашите продукти. Ние не само предоставяме висококачествен хиноцетон, но и подкрепяме нашите клиенти в разбирането на методите за откриване на неговите остатъци. Ако се интересувате от нашите продукти от хиноцетон или имате въпроси относно откриването на остатъци от хиноцетон, моля не се колебайте да се свържете с нас за по -нататъшно обсъждане и договаряне на поръчки.
ЛИТЕРАТУРА
- Wang, X., & Zhang, Y. (2018). Методи за откриване на ветеринарни остатъци от лекарства в млякото: преглед. Journal of Dairy Science, 101 (3), 2134 - 2148.
- Liu, H., & Chen, S. (2019). Имунологични методи за откриване на антибиотични остатъци в храната. Химия на храните, 281, 451 - 460.
- Li, M., & Zhao, Q. (2020). Биосензори за откриване на замърсители в млякото. Сензори и задействащи механизми, химикали, 310, 127774.